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Jun 11, 2023

Untersuchung der Konkurrenz zwischen Colletotrichum godetiae und C. nymphaeae, zwei pathogenen Arten in Olivenbäumen

Scientific Reports Band 13, Artikelnummer: 5344 (2023) Diesen Artikel zitieren 651 Zugriffe 44 Altmetric Metrics-Details Olive Anthracnose, eine kritische Olivenfruchtkrankheit, die sich negativ auf Öl auswirkt

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Olivenanthraknose, eine kritische Olivenfruchtkrankheit, die sich negativ auf die Ölqualität auswirkt, wird durch Colletotrichum-Arten verursacht. In jedem Olivenanbaugebiet wurden eine dominante Colletotrichum-Art und mehrere sekundäre Arten identifiziert. Diese Studie untersucht die interspezifische Konkurrenz zwischen C. godetiae, dominant in Spanien, und C. nymphaeae, vorherrschend in Portugal, um Licht auf die Ursache dieser Ungleichheit zu werfen. Als Petrischalen mit Kartoffel-Dextrose-Agar (PDA) und verdünntem PDA mit Sporenmischungen beider Arten beimpft wurden, verdrängte C. godetiae C. nymphaeae, selbst wenn der Prozentsatz der Sporen in der anfänglichen Sporenmischungsimpfung nur 5 und betrug 95 % bzw. Die Arten C. godetiae und C. nymphaeae zeigten bei getrennten Inokulationen in beiden Sorten eine ähnliche Fruchtvirulenz, die portugiesische Sorte. Galega Vulgar und der spanische Lebenslauf. Hojiblanca, und es wurde keine Sortenspezialisierung beobachtet. Bei der Co-Inokulation von Olivenfrüchten zeigte die C. godetiae-Art jedoch eine höhere Konkurrenzfähigkeit und verdrängte die C. nymphaeae-Art teilweise. Darüber hinaus zeigten beide Colletotrichum-Arten eine ähnliche Blattüberlebensrate. Schließlich war C. godetiae resistenter gegen metallisches Kupfer als C. nymphaeae. Die hier entwickelte Arbeit ermöglicht ein tieferes Verständnis der Konkurrenz zwischen C. godetiae und C. nymphaeae, was zur Entwicklung von Strategien für eine effizientere Bewertung des Krankheitsrisikos führen könnte.

Der Olivenbaum ist die am weitesten verbreitete Holzpflanze und bedeckt weltweit 12 Millionen Hektar, hauptsächlich in Mittelmeerregionen1. Die europäische Olivenproduktion macht 65 % des Weltmarktes aus, wobei Spanien der Hauptproduzent ist, gefolgt von Italien, Griechenland und Portugal2. Infolgedessen übt die Olivenindustrie enorme soziale und wirtschaftliche Auswirkungen auf die Mittelmeerländer aus.

Der Olivenbaum kann von mehreren Krankheiten und Schädlingen befallen sein. Die wichtigste Fruchtkrankheit des Olivenbaums ist Anthracnose, verursacht durch Pilzarten der Gattung Colletotrichum, die ebenso wichtig sind wie Schäden durch den Schädling der Olivenfliege (Bactrocera oleae Rossi), da beide zu erheblichen Ertragsverlusten3 führen und auch die Ölqualität beeinträchtigen können4 ,5,6. In Spanien sind landesweit durchschnittlich 2,6 % der Ernteverluste auf Anthracnose zurückzuführen4.

Olivenanthracnose weist zwei unterschiedliche Syndrome auf (dh eine Kombination aus Symptomen oder Symptomen und Krankheitserregerzeichen): Fruchtfäule und Absterben der Zweige. Befallene Früchte zeigen in einem frühen Reifestadium nekrotische Läsionen, die bis zur vollständigen Steinfruchtfäule fortschreiten4,5. Auf befallenen Früchten entwickelt der Pilz asexuelle Fruchtkörper (Acervuli), die eine Masse von Konidien in einer rosa-orangefarbenen Gelatinematrix produzieren6,7. Wenn die Luftfeuchtigkeit sinkt und die Temperatur steigt, mumifizieren die betroffenen Olivenfrüchte5,7. Die Colletotrichum-Arten besiedeln dann den Stiel befallener Früchte, die zu Boden fallen. Einige mumifizierte Früchte können jedoch bis zum nächsten Herbst-Winter im Baumdach verbleiben7. Bei Oliven, die vom zweiten Syndrom betroffen sind, weisen die apikalen Blätter nekrotische Ränder auf, die bis zu ihrer vollständigen Trocknung fortschreiten können, was zum Absterben von Trieben und Hauptzweigen führt4,7,8. Dieses zweite Syndrom wurde mit pathogenen Toxinen in Verbindung gebracht, die in den betroffenen Früchten produziert und in die Triebe mobilisiert werden7,9. Da die Entwicklung von Acervuli auf infizierten Blättern selten vorkommt, sind mumifizierte Olivenfrüchte die primäre Inokulumquelle3,5,6. Einige Autoren vermuten jedoch, dass infizierte Blätter auch ein Inokulumreservoir darstellen10. Da Colletotrichum-Arten auf die Infektion von Olivenfrüchten spezialisiert sind, hätten Arten, die infizieren und auf den Blättern verbleiben könnten, einen wesentlichen Wettbewerbsvorteil10.

Anthracnose ist weit verbreitet und kommt in den meisten Olivenanbaugebieten vor, auch in Gebieten außerhalb des Mittelmeerraums. Achtzehn Colletotrichum-Arten wurden weltweit als Erreger von Oliven-Anthracnose identifiziert3,4,5. Diese Arten sind in drei Komplexe gruppiert: C. acutatum JH Simmonds, C. gloeosporioides (Penz.) Penz. & Sacc. und C. boninense Moriwaki, Toy. Sato & Tsukib4,11. Bemerkenswert ist, dass in jeder Region normalerweise eine dominante Colletotrichum-Art beschrieben wird, während andere Arten dieser Gattung zweitrangig oder selten sind6,10,11. Ebenso hat jedes traditionelle Olivenanbauland seine eigenen nationalen Sorten, die nach ihrer Bedeutung und Verbreitung von Hauptsorten (die in mehreren Olivenbezirken vorherrschen) bis hin zu lokalen Sorten (einzelne Oliven in einem bestimmten Bezirk) klassifiziert werden können12. So verbinden sich Colletrotrichum-Arten und traditionelle Olivensorten zu Paaren, die für die verschiedenen endemischen Regionen charakteristisch sind. Beispielsweise ist „Galega Vulgar“ eine repräsentative Sorte in Portugal, die anfällig für den Pilz ist4,15. In Portugal werden die Ausbrüche der Anthracnose-Epidemie hauptsächlich durch die Art C. nymphaeae verursacht4,11,14. Auf derselben Halbinsel, in den Anthracnose-Endemiegebieten der Region Andalusien (in Südspanien), sind die sehr anfälligen Sorten „Hojiblanca“, „Lechin de Sevilla“ und „Picudo“ die wichtigsten Sorten3. In Andalusien ist C. godetiae die dominierende Art in Olivenplantagen, ebenso wie in Griechenland, Montenegro und Italien5,11,14,25.

Mehrere Autoren haben die Koexistenz zwischen einer häufig vorkommenden Colletotrichum-Art und mehreren sekundären Arten dieser Gattung in Olivenplantagen auf der ganzen Welt beschrieben11,15,16. Die möglichen Mechanismen, die bestimmen, warum bestimmte Colletotrichum-Arten gegenüber anderen dominieren, sind jedoch noch unbekannt. Dieses unausgewogene Vorkommen der Colletotrichum-Arten könnte auch auf (1) Unterschiede in der Fähigkeit der Arten, Inokulum in Olivenblättern zu produzieren, (2) Anpassung an das regionale Klima, (3) eine pathogene Spezialisierung auf lokal vorherrschende Sorten, (4) zurückzuführen sein ) die Fähigkeit, andere Wirte (z. B. Unkräuter) zu infizieren, oder (5) ein vorrangiger Effekt, d. h. die Reihenfolge der Ankunft der Arten im Olivenhain kann das Artenmuster beeinflussen10,13,14. Auch der Selektionsdruck, der durch die wiederholte Anwendung von Fungiziden auf Kupferbasis (den wichtigsten Fungiziden, die in Olivenplantagen verwendet werden) ausgeübt wird, könnte die Unterschiede zwischen Colletotrichum-Arten aufgrund ihrer Resistenz bewirken17.

Ziel dieser Studie ist es, Licht auf die unausgewogene Verteilung von Colletotrichum-Arten zu werfen, die Olivenbäume befallen, und konzentriert sich dabei auf das Verständnis der interspezifischen Konkurrenz zwischen C. godetiae und C. nymphaeae in (1) doppelt kultivierten Medien unterschiedlicher Reichhaltigkeit, (2) Früchten und Blättern von der portugiesische Lebenslauf. Galega Vulgar und der spanische Lebenslauf. Hojiblanca und (3) Olivenpflanzen unter Kontrollbedingungen.

Durch diese Studie konnten wir Aspekte wie die Art der Sorte des Erregers oder die Gewebespezialisierung klären. Folglich liefern die aus unserer Studie gewonnenen Informationen Einblicke in die Art Colletotrichum spp. Populationsdynamik in Olivenhainen sowie Wissen zur Verbesserung der Risikobewertung der Oliven-Anthracnose-Krankheit.

In verschiedenen Experimenten wurden verschiedene C. godetiae- und C. nymphaeae-Stämme verwendet, die in der mykologischen Sammlung der Agronomieabteilung der Universität von Cordoba (Spanien) aufbewahrt werden. Zwei C. nymphaeae-Stämme, Col-573 und Col-580, wurden aus betroffenen Olivenhainen in Capela und Montesadinha (Portugal) gewonnen. Die C. godetiae-Stämme Col-556 und Col-703 wurden aus Oliven gewonnen, die in Beja (Portugal) bzw. Huelva (Spanien) stark von Anthracnose befallen waren. Stämme wurden anhand ihrer internen transkribierten Spacer-5.8S- und β-Tubulin-Regionen identifiziert11. Da beide Colletotrichum-Arten auf Kartoffel-Dextrose-Agar (PDA; 25 % Kartoffelextrakt, 2 % Dextrose, 2 % Agar und pH 4,518) unterschiedliche morphologische Merkmale aufweisen, konnten diese in Dualkultur-Assays schnell identifiziert und quantifiziert werden. Insgesamt waren die C. godetiae-Kolonien dunkelgrau, während die C. nymphaeae-Kolonien in PDA weiß mit Baumwollmyzel waren (Abb. 1A). Unsere Untersuchungen gehen davon aus, dass die Interaktion zwischen beiden Colletotrichum-Arten einen interspezifischen (verschiedenen Arten-)Wettbewerb um dieselbe Ressource (Medium, Früchte oder Blätter) beinhaltet19.

(A) Dunkelgraue Kolonien von Colletotrichum godetiae (Col-556), weiße Baumwollkolonien von C. nymphaeae (Col-573) und co-kultivierte C. godetiae (Col-556) vs. C. nymphaeae (Col-573) auf Kartoffeldextrose Agar (PDA)-Medium; (B) der relative Prozentsatz der Kolonien (Mittelwert und Standardfehlerwerte durch Gruppierung der drei durchgeführten Wiederholungen) von C. godetiae und C. nymphaeae, die auf PDA gezüchtet und verdünntes PDA mit fünf verschiedenen Anfangsverhältnissen von Konidienmischungen co-inokuliert wurden. Die Behandlungen entsprechen einem unterschiedlichen Sporenverhältnis beider Colletotrichum-Arten zu Beginn des Experiments (Generation 1); 95:5; 75:25; 50:50; 25;75; und 5:95-Verhältnisse (%) der Sporen von C. godetiae: C. nymphaeae.

Zur Inokulumproduktion wurden Colletotrichum-Stämme 7 Tage lang bei 20 °C im Dunkeln auf PDA gezüchtet. Konidiensuspensionen wurden einzeln hergestellt, indem Krankheitserregerkolonien mit einem Skalpell von der Mediumoberfläche abgekratzt wurden, und in zwei 250-ml-Erlenmeyerkolben mit 100 ml sterilem destilliertem Wasser überführt. Beide resultierenden Suspensionen wurden durch ein doppellagiges steriles Käsetuch filtriert, um Hyphenfragmente zu entfernen. Konidiensuspensionen wurden mithilfe einer Neubauer-Kammer auf eine Enddichte von 3 × 105 Konidien/ml eingestellt.

Es wurden Doppelkulturtests durchgeführt, um den Einfluss von Kulturmedien und Temperatur auf die kompetitive Verdrängung einer Art durch eine andere zu bestimmen23. Es wurden drei verschiedene Konidiensuspensionen (5 × 102 Konidien/ml) hergestellt: C. godetiae, C. nymphaeae und eine Mischung beider Arten im gleichen Verhältnis (50:50). Die drei Arten von Sporensuspensionen wurden getrennt kultiviert, indem 100 µl pro 90-mm-Petrischalen (50 Konidien pro Schale) aseptisch mit 20 ml PDA oder verdünntem PDA (4 % Kartoffellauge, 0,75 % Dextrose, 2 % Agar) ausgebreitet wurden pH-Wert 4,5). Als Medium wurde verdünntes PDA mit einer Kohlenstoffkonzentration unter PDA18 verwendet. Petrischalen wurden bei 15, 20 und 25 °C im Dunkeln inkubiert. Fünf replizierte Schalen pro Kombination aus Colletotrichum-Arten-Konidien-Suspensionskultur bei mittlerer Temperatur wurden in einem vollständig randomisierten Design verwendet. Nach einer 4-tägigen Wachstumsphase wurden die Kulturen untersucht und die Anzahl der Kolonien jeder Art pro Platte aufgezeichnet. Anschließend wurde der prozentuale Anteil jeder Art im Verhältnis zur Gesamtzahl der Kolonien pro Platte berechnet.

Durch Mischen von Konidiensuspensionen der Stämme Col-556 und Col-573, die zuvor wie oben beschrieben hergestellt wurden, wurden Suspensionen hergestellt, die Prozentsätze an Konidien in den folgenden Verhältnissen enthielten: 100:0, 95:5, 75:25, 50:50, 25:75, 5:95 und 0:100 von C. godetiae:C. Nymphen. Gemischte Konidiensuspensionen wurden auf eine Enddichte von 5 × 102 Konidien pro ml eingestellt.

Konkurrenztests zwischen den Colletotrichum-Arten wurden in PDA und verdünntem PDA durchgeführt. Für jede Kombination aus Konidiensuspension und Kulturmedium wurden fünf nachgebildete Petrischalen verwendet. Alle Petrischalen wurden aseptisch mit 100 µl einer Konidiensuspension bestrichen und 5 Tage lang im Dunkeln bei 20 °C inkubiert. Nach der Inkubation wurden Kolonien von C. godetiae (Stamm Col-556) und C. nymphaeae (Stamm Col-573) wie zuvor beschrieben aufgezeichnet und die Ergebnisse als relative Prozentsätze ausgedrückt. Petrischalen mit den Colletotrichum-Kolonien wurden mit 1 ml sterilem Wasser gewaschen, um ein neues Konidien-Inokulum für den folgenden Zyklus zu erhalten. Die resultierende Suspension wurde mit sterilem destilliertem Wasser auf 5 × 102 Konidien/ml eingestellt und in einen neuen Satz von fünf Petrischalen überführt. Das Experiment war nach fünf Zyklen (dh Übertragung der Konidien auf das Medium – Inkubation – Waschen und Quantifizieren der Konidien) abgeschlossen und wurde dreimal wiederholt. Eine zusätzliche Wiederholung wurde mit den Stämmen Col-703 und Col-580 (C. godetiae bzw. C. nymphaeae) durchgeführt, um das Verhalten der Stämme zu vergleichen.

Olivenfrüchte der spanischen und portugiesischen Sorten Hojiblanca und Galega Vulgar wurden von 10 Jahre alten Oliven gesammelt, die bei der World Olive Germplasm Bank (WOGB) in Cordoba (Spanien) gepflanzt wurden. Beide Sorten sind anfällig für den Erreger13. Die Früchte wurden im phänologischen Wachstumsstadium 81–85 (BBCH-Skala)20 geerntet und bis zur Verwendung bei 4 °C gelagert. Frau Pablo Morello, Verantwortliche des WOGB, erteilte uns die Erlaubnis, das für die vorliegende Studie notwendige Olivenmaterial zu sammeln.

Die Früchte wurden zunächst unter fließendem Wasser gewaschen, durch 1-minütiges Eintauchen in eine 10 %ige Lösung von handelsüblichem Bleichmittel (Cl bei 50 g/l) in sterilem Wasser an der Oberfläche desinfiziert, mit sterilem Wasser gespült und in einer biologischen Sicherheitswerkbank luftgetrocknet 1 Std. Anschließend wurden die Früchte in feuchte Kammern gegeben, die aus 22 × 16 × 10 cm großen Kunststoffbehältern bestanden (20 Früchte pro Kammer), mit 100 % relativer Luftfeuchtigkeit40.

Olivenfrüchte wurden durch Aufsprühen einer Konidiensuspension (1 × 105 Konidien/ml; 0,4 ml pro Frucht) von C. godetiae, C. nymphaeae oder einer Mischung (50:50) von Konidien beider Arten inokuliert, um die interspezifische Konkurrenz währenddessen zu beurteilen Fruchtinfektion. Feuchtkammern mit inokulierten Früchten wurden bei 15, 20 oder 25 °C inkubiert. Ein vollständig randomisiertes Design wurde unter Verwendung von 162 feuchten Kammern (2 Sorten × 3 Konidiensuspensionen × 3 Inkubationstemperaturen × 3 Wiederholungen) durchgeführt.

Der Schweregrad der Erkrankung wurde wöchentlich anhand eines Bewertungssystems von 0–5 bewertet, wobei 0 = keine sichtbaren Symptome, 1 = sichtbare Symptome, die weniger als 25 % der Fruchtoberfläche betreffen, 2 = sichtbare Symptome, die 26–50 % der Oberfläche betreffen, 3 = sichtbar Symptome, die 51–75 % der Oberfläche betreffen, 4 = sichtbare Symptome, die 76–99 % der Oberfläche betreffen, und 5 = vollständig verfaulte Früchte (100 %), die die typischen rosa-orangefarbenen gallertartigen Pusteln zeigen. Für jede Replikation wurden Schweregrade (0–5) verwendet, um den Krankheitsschwereindex (DSI) mithilfe der folgenden Formel zu berechnen: DSI = [(Σni × i)/N] × 100, wobei i den Schweregrad (0–5) bedeutet. , ni steht für die Anzahl der Früchte mit einem Schweregrad i und N ist die Gesamtzahl der Früchte. Die Daten wurden verwendet, um die relative Fläche unter der Krankheitsverlaufskurve (rAUDPC) durch die trapezförmige Integration der DSI-Werte über die Zeit zu berechnen21.

Nach 4-wöchiger Inkubation wurden 8–10 vollständig verfaulte Olivenfrüchte (Schweregrad = 5) aus den drei replizierten Feuchtkammern gruppiert und als Inokulumquelle verwendet. Zu diesem Zweck wurden die betroffenen Früchte in 250-ml-Erlenmeyerkolben mit 100 ml sterilem destilliertem Wasser überführt und 2 Minuten lang leicht manuell geschüttelt, um das Inokulum zu waschen. Die resultierende Konidiensuspension wurde wie zuvor beschrieben filtriert und für die Inokulation neuer Früchte auf 1 × 105 Konidien/ml eingestellt, was den natürlichen Krankheitszyklus widerspiegelt. Das Experiment wurde nach drei „Krankheitszyklen“ beendet und zweimal durchgeführt. Um die kompetitive Verdrängung einer Art durch eine andere zu quantifizieren, wurden mit der Mischung beimpfte Früchte am Ende des Experiments in 250-ml-Kolben überführt und mit 100 ml sterilem Wasser gewaschen. Die Konidiensuspension (5 × 102 Konidien/ml) wurde dann auf PDA-Medium ausgebreitet und die Anzahl der Kolonien jeder Art wurde wie zuvor beschrieben aufgezeichnet.

Dreihundertsechzig gesunde Einzelblätter der anfälligen Sorten Hojiblanca und Galega Vulgar wurden von erwachsenen Bäumen des WOGB geerntet und inokuliert, um die Fähigkeit von C. godetiae und C. nymphaeae zu beurteilen, dieses Gewebe zu infizieren. Zu diesem Zweck wurden Blätter (180 pro Sorte) in einer 10 %igen handelsüblichen Bleichlösung (Cl bei 50 g/l) in sterilem Wasser 1 Minute lang oberflächlich desinfiziert und in sechs feuchte Kammern (20 Blätter pro Kammer) gegeben. Anschließend wurden die Blätter mit einer Konidiensuspension (5 × 102 Konidien/ml, 0,4 ml pro Blatt) von C. godetiae:C. nymphaeae in einem Verhältnis von 50:50 (Sporen:Sporen) inokuliert, wie zuvor im Fall von Früchten beschrieben Impfung. Auch hier wurde ein vollständig randomisiertes Design mit 18 feuchten Kammern (2 Sorten × 3 Konidiensuspensionen × 3 Wiederholungen) verwendet, die bei 20 °C im Dunkeln inkubiert wurden. Sieben Tage nach der Inokulation wurden die Blätter erneut oberflächlich desinfiziert, um die Oberflächenkonidien zu entfernen, die keine Infektion in den Blättern verursacht hatten. Die Blätter wurden später weitere 5 Tage lang inkubiert. Nach der Inkubation wurden die Blätter in 0,5 cm² große Abschnitte (fünf pro Blatt) geschnitten, auf PDA-Schalen gelegt und unter den gleichen Bedingungen inkubiert. Nach 6-tägiger Inkubation wurden die über den Blattstücken gewachsenen Kolonien jedes Isolats quantifiziert und der Prozentsatz der mit jeder Art besiedelten Stücke berechnet. Das Experiment wurde zweimal durchgeführt.

Dreijährige Olivenpflanzen der Sorte cv. Arbequina, eine Sorte, die mäßig resistent gegen Colletotrichum spp.13 ist, wurde mit Konidiensuspensionen von C. godetiae, C. nymphaeae oder einer Mischung beider Arten inokuliert, um ihre Fähigkeit zu beurteilen, während der gesamten Saison auf Blättern zu überleben. Die Pflanzen wurden in einer kommerziellen Gärtnerei gekauft und unter fließendem Wasser gewaschen. Alle Früchte wurden manuell entfernt. Konidiensuspensionen (5 × 102 Konidien/ml) von C. godetiae: C. nymphaeae in Verhältnissen von 100:0, 50:50 und 0:100 wurden wie zuvor beschrieben hergestellt. Die Pflanzen wurden durch Aufsprühen einer Konidiensuspension in einer Menge von 30 ml pro Pflanze inokuliert. Als nicht inokulierte Kontrolle dienten mit sterilem Wasser besprühte Pflanzen. Inokulierte Pflanzen wurden 24 Stunden lang in einer dunklen Wachstumskammer (20 °C, 100 % relative Luftfeuchtigkeit) gehalten, um infektionsfördernde Bedingungen zu schaffen. Anschließend wurden die Pflanzen in ein Gewächshaus bei 25–30 °C überführt, wobei ein Abstand zwischen den Behandlungen von 1 m eingehalten wurde. Olivenpflanzen wurden nach Bedarf einer Tropfbewässerung unterzogen.

Darüber hinaus wurden alle Pflanzen jeden Monat mit Überkopfsprinklern bewässert (10 mm), um die Ausbreitung des Krankheitsinokulums unter natürlichen Bedingungen zu simulieren. Es wurde ein vollständig randomisiertes Design mit 5 Pflanzen (Replikaten) pro Behandlung (Konidiensuspension) verwendet und das Experiment zweimal wiederholt. Blattproben wurden sechs Monate lang in monatlichen Abständen entnommen und bestanden aus 25 Blättern, die zufällig von den fünf Pflanzen jeder Behandlung entnommen wurden. Alle Proben wurden wie zuvor besprochen oberflächendesinfiziert, um das verbleibende Inokulum zu entfernen. Abschließend wurde die Anzahl der von jedem Isolat besiedelten Blätter bestimmt.

Die vier in unseren Studien verwendeten Colletotrichum-Stämme wurden auf ihre Kupferresistenz untersucht, da die meisten Oliven-Anthracnose-Fungizide auf Kupfer basieren4,5. Daher wurden Agarpfropfen (7 mm Durchmesser) vom Rand aktiv wachsender Kolonien gesammelt und in der Mitte von 9-cm-Petrischalen platziert, die PDA-Medium enthielten, das mit CuSO4 (100 µl/ml) (Kupfersulfat; Merk Lab) angereichert war Kontroll-PDA-Medium (nicht geändertes Medium). Es wurden fünf Replikate (Petrischalen) pro Isolat und Behandlung hergestellt. Alle Schalen, einschließlich der Kontrollen, wurden bei 20 °C im Dunkeln inkubiert. Der Durchmesser jeder Kolonie wurde gemessen, als die Kontrollkolonien den Schalenrand erreichten, normalerweise 7 Tage nach der Inkubation. Die Myzelwachstumsrate (mm pro Tag) und die Konidienproduktionsrate (Konidien pro cm2) wurden pro Isolat und Replikation bestimmt. Zu diesem Zweck wurden Konidien suspendiert, mit 2 ml sterilem Wasser gespült und Myzelien mit einer sterilen Klinge von der Oberfläche abgekratzt. Die Konidienkonzentration in den resultierenden Suspensionen wurde unter Verwendung einer Neubauer-Kammer bewertet. Schließlich wurde die Wirkung von Cu auf das Myzelwachstum und die Konidienproduktion als Prozentsatz der Hemmung in Bezug auf die Kontrollbehandlung berechnet17.

Zusätzlich wurde die Cu-Absorption der beiden Colletotrichum-Arten nach Martins et al.22 mit Modifikationen bestimmt. Kurz gesagt, drei 9-mm-Agarpfropfen jedes Colletotrichum-Isolats wurden separat in einen 100-ml-Kolben gegeben, der 50 ml PDB (Kartoffel-Dextrose-Brühe), angereichert mit CuSO4 (100 µl/ml) oder Kontroll-PDB-Medium enthielt. Die Kolben wurden 7 Tage lang unter Rühren (130 U/min/min) bei 23 °C unter Hell/Dunkel-Bedingungen inkubiert. Das Experiment wurde dreimal wiederholt. Nach der Inkubation wurde das Myzel gewonnen und bei 60 °C auf einem Herd bis zur konstanten Trockenmasse getrocknet. Getrocknetes Myzel wurde 24 Stunden lang einem sauren Aufschluss (6 N-HCl) unterzogen, um die Probe vollständig aufzulösen. Abschließend wurde die Kupferquantifizierung mittels Massenspektrometrie und Chromatographie (Bruker TQ MS) durchgeführt.

Alle beschriebenen Verfahren wurden gemäß den europäischen und internationalen Richtlinien und Vorschriften durchgeführt, einschließlich denen der Universität (Spanien), der Europäischen Kommission und der Food Agriculture Institution (FAO).

Der Prozentsatz der Colletotrichum-Kolonien, die Einheiten auf PDA oder verdünntem PDA bilden, monokultiviert oder dual kultiviert bei verschiedenen Temperaturen, wurde unter Verwendung eines allgemeinen linearen Modells unter Berücksichtigung der ANOVA-Einschränkungen bewertet. Anschließend wurden die Behandlungen mit einem Tukey-Test verglichen, der auf P < 0,05 eingestellt war. Im Konkurrenztest in Medien wurden Mittelwerte und 95 %-Konfidenzintervalle (CI95) berechnet und t-Werte, die sich beim CI95 nicht überlappten, wurden als signifikant (P < 0,05) unterschiedlich angesehen23. Im Fruchtinokulationstest wurden die rAUDPC-Daten arcsin-transformiert, um die Annahmen zur Normalität und Homogenität der Varianz zu erfüllen. Anschließend wurde eine allgemeine ANOVA angewendet, wobei als Fehlerterm die Wechselwirkung Colletotrichum-Isolat × Inkubationstemperatur × Olivensorte × Experiment-Wiederholung verwendet wurde. Die Mittelwerte wurden gemäß dem Tukey-Test verglichen, angepasst auf P < 0,05. Um die Sporenproduktion jeder Colletotrichum-Art auf co-inokulierten Früchten zu vergleichen, wurde ein Chi-Quadrat-Test durchgeführt. Darüber hinaus wurde ein logarithmisch-lineares Modell verwendet, um die Wirkung der Sorte und der Colletotrichum-Art (oder Mischungsart) auf die gesamte Konidienproduktion des Krankheitserregers auf inokulierten Früchten zu überprüfen. In Experimenten mit abgelösten Blättern wurden die Daten jeder Sorte mithilfe eines Chi-Quadrat-Tests analysiert. Die Wirkung der Colletotrichum-Art auf die Myzel- und Sporenhemmung (%) aufgrund von Cu wurde mithilfe eines Wilcoxon-Signed-Rank-Tests untersucht. Dieser Test wurde auch durchgeführt, um die Größe von Konidien und Hyphen bei Colletotrichum-Arten zu vergleichen. Die Daten wurden mit Statistix 10 (Version 10; Tallahassee) und der SPSS-Software (Version 25.0; SPSS Inc., Chicago) analysiert.

Wie oben erwähnt, wurden beide Colletotrichum-Arten eindeutig als in Kulturmedien (PDA und verdünntes PDA) wachsend identifiziert, was uns die Durchführung der verschiedenen Tests in unserer Studie ermöglichte. Insgesamt sind Konidien von Colletotrichum spp. waren (8,4)12,5–16,1(18,9) × (3)3,9–5,3(7,4) µm für C. godetiae (Col-556) und (6,6)8,7–20,4(29,2) × (2,4)2,5–7,1(9,3) µm C. nymphaeae (Col-573). Die Hyphengrößen reichten von (2,1)2,4 bis 4,7(6,0) µm für Col-556 und von (1,7)1,9 bis 4,2(4,7) µm für Col-573. Der Wilcoxon-Rank-Sum-Test (P > 0,05) ergab jedoch keine signifikanten Unterschiede in den Pilzstrukturen.

Beide Colletotrichum-Arten entwickelten auf PDA und verdünntem PDA differenzierte Kolonien. Gemäß dem Mixed-Effects-Modell hatten die Colletotrichum-Art (P < 0,001) und die Inkubationstemperatur (P = 0,024) einen signifikanten Einfluss auf die Anzahl der Pilzkolonien auf den Medien. Im Gegensatz dazu waren die übrigen unabhängigen Variablen (Kulturmedien und Mono- oder Co-Kultivierung) und ihre Wechselwirkungen nicht signifikant (P > 0,05). Somit bildeten C. nymphaeae auf beiden Medien deutlich mehr Kolonien als C. godetiae (83,5 % bzw. 62,9 %). Ebenso entwickelten beide Pilzarten unabhängig vom verwendeten Kulturmedium bei 20 °C mehr Kolonien als bei 15 °C. Es wurde kein signifikanter Effekt (Synergismus oder Antagonismus, P = 0,666) der Doppelkultur beider Arten beobachtet (Tabelle 1).

Abbildung 1B stellt den Prozentsatz der C. godetiae- und C. nymphaeae-Kolonien dar, die aus doppelt kultiviertem PDA und verdünntem PDA gewonnen wurden. Betrachtet man den globalen Datensatz, einschließlich der drei Wiederholungen, so verdrängte insgesamt der Stamm Col-556 von C. godetiae den Stamm Col-573 von C. nymphaeae in co-inokulierten PDA-Schalen und setzte sich unabhängig vom anfänglichen Konidienverhältnis allmählich gegenüber der Population durch . In PDA-Schalen beispielsweise lag der Prozentsatz der C. godetiae-Kolonien im letzten Zyklus bei allen Behandlungen bei über 80 %, mit Ausnahme der Mischung C. godetiae: C. nymphaeae 05:95, die bei 44,43 % lag. Dementsprechend wurde in Experimenten mit verdünntem PDA eine deutliche Prävalenz von C. godetiae beobachtet. Tatsächlich war der Stamm C. godetiae nach Abschluss des Experiments der Hauptstamm bei allen Mischungsbehandlungen. In der zusätzlichen Wiederholung, die wir in verdünntem PDA mit den Stämmen Col-703 und Col-580 von C. godetiae bzw. C. nymphaeae durchgeführt haben, fanden wir das gleiche Muster, wobei die Anzahl der Kolonien von C. godetiae deutlich höher war als die von C. nymphaeae am Ende des Experiments für jede verwendete Kombination (Abb. 1S).

Der Schweregrad der Erkrankung an Früchten wurde in jedem Zyklus für jede Sorten- und Temperaturkombination separat überwacht (Abb. 2A), indem die beiden durchgeführten Wiederholungen gruppiert wurden, da diese ein ähnliches Muster zeigten. Interessanterweise zeigten die Arten C. godetiae und C. nymphaeae eine ähnliche (P = 0,501) Virulenz auf den Früchten beider Olivensorten. Ebenso zeigten unsere Daten keine signifikante Wechselwirkung zwischen Colletotrichum-Arten und -Sorten (P = 0,527); Das heißt, es kam zu keiner sortenpathogenen Spezialisierung. Darüber hinaus waren „Hojiblanca“-Früchte anfälliger (P = 0,032) für den Erreger als „Galega Vulgar“-Früchte. Beimpfte Früchte, die bei 15 °C inkubiert wurden, waren weniger betroffen (P = 0,045) als solche, die bei 25 °C inkubiert wurden, ähnelten aber denen bei 20 °C.

(A) Krankheitsschwere (Mittelwert und Standardabweichungswerte durch Gruppierung der beiden durchgeführten Wiederholungen), bewertet als relative Fläche unter der Krankheitsverlaufskurve (rAUDPC) von Olivenfrüchten der Sorten Hojiblanca und Galega Vulgar, die mit Konidiensuspensionen von Colletotrichum godetiae inokuliert wurden, C. nymphaeae und eine Mischung beider Arten (50:50) gemischt und bei 15, 20 und 25 °C inkubiert. (B) Kolonien (%) von C. godetiae und C. nymphaeae aus betroffenen Olivenfrüchten von cvs. Hojiblanca und Galega Vulgar wurden mit einer Mischung (50:50 %) der Sporen beider Arten koinokuliert und bei 15, 20 und 25 °C inkubiert. Signifikante Unterschiede zwischen Colletotrichum-Arten gemäß Chi-Quadrat-Test bei P < 0,001***, P < 0,01** und P < 0,05*.

Unsere Daten zeigten, dass die Art C. godetiae ihren Konkurrenten bei 15 °C auf den inokulierten Früchten beider Sorten nach drei simulierten Krankheitszyklen verdrängte. Ebenso war C. godetiae bei 20 °C konkurrenzfähiger, jedoch nur bei „Galega Vulgar“-Früchten. Bei der Inkubation der Früchte bei 25 °C wurden keine signifikanten Unterschiede beobachtet (Abb. 2B).

Als wir die Anzahl der von den betroffenen Olivenfrüchten produzierten Sporen nach dem Pearson-Chi-Quadrat des logarithmischen linearen Modells bewerteten, wurde das Gesamtinokulum pro Frucht nicht durch die Sorte Colletotrichum oder die Temperatur beeinflusst (Abb. 2S).

Wenn Olive den Lebenslauf verlässt. Galega Vulgar und Hojiblanca wurden mit beiden Colletotrichum-Arten co-inokuliert; C. godetiae zeigte eine höhere Fähigkeit als C. nymphaeae, sich in „Galega Vulgar“-Blättern niederzulassen (P < 0,01), diese Unterschiede wurden jedoch im Lebenslauf nicht erfasst (P > 0,05). Hojiblanca-Blätter (Abb. 3A).

(A) Relativer Prozentsatz der Kolonien von Colletotrichum godetiae und C. nymphaeae, die aus abgelösten Blättern der Sorten Galega Vulgar und Hojiblanca gewonnen wurden, die mit beiden Isolaten koinokuliert wurden. Prozentsatz der Olivenblätter im Lebenslauf. Arbequina, die gemeinsam (B) oder unabhängig voneinander (C) mit beiden Colletotrichum-Arten inokuliert wurden, deren Krankheitserreger nachgewiesen wurden. *Signifikanz zwischen relativen Prozentsätzen gemäß Chi-Quadrat-Test.

Insgesamt wurden Colletotrichum-Stämme beider Arten aus Olivenblättern von eingetopften Sorten gewonnen. Arbequina-Pflanzen während des gesamten Experiments (Abb. 3B,C). Allerdings kam es während beider Experimente zu einem allmählichen Rückgang des Prozentsatzes der von den Colletotrichum-Isolaten besiedelten Blätter, d. h. wenn die Pflanzen separat mit beiden Arten oder gemeinsam inokuliert wurden. Am Ende beider Experimente (5 Monate nach der Inokulation) wurde Colletotrichum aus co-inokulierten Blättern in Prozentsätzen von weniger als 10 % isoliert, C. godetiae-Arten wurden jedoch nicht aus Pflanzenblättern isoliert, die nur mit dieser Art inokuliert wurden.

Colletotrichum godetiae-Stämme waren kupfertoleranter (P < 0,05) als C. nymphaeae-Stämme, entsprechend der prozentualen Hemmung des Myzelwachstums (−0,6 vs. 4,4 %) und der Sporenproduktion (−48,8 vs. 68,8 %) bei Kulturmedien wurde mit Kupfer geändert, berechnet im Verhältnis zu einer unveränderten Kontrolle. In einigen Wiederholungen (Petrischalen) induzierte das Vorhandensein von Kupfer die Sporenproduktion, hauptsächlich bei C. godetiae-Stämmen. Darüber hinaus beruhte die Resistenz von C. godetiae gegenüber Kupfer auf seiner Fähigkeit, die Cu-Anreicherung im Myzel zu verhindern (durchschnittlich 364 µg Cu/g Myzel, niedriger als bei C. nymphaeae). Es wurden jedoch keine signifikanten Unterschiede (P = 0,173) zwischen beiden Arten festgestellt. In jedem Fall zeigten Kolonien beider Arten, die in mit Cu angereicherten Medien wuchsen, einen deutlich höheren Cu-Gehalt als Kontrollkolonien und erreichten Konzentrationen, die über 100-mal höher waren (Tabelle 2).

Der Olivenbaum ist eine der am weitesten verbreiteten Holzkulturen weltweit und die Nachfrage nach Olivenöl steigt weiter1,12. Oliven-Anthracnose, die durch mehrere Colletotrichum-Arten verursacht wird, ist für Olivenölproduzenten von großer Bedeutung, da (1) sie sich negativ auf die Ölqualität auswirkt3,5, (2) sich die Pflanze tendenziell in hoher Pflanzendichte entwickelt, der größte Auslöser ist Hecken- geformte Olivenhaine, die besonders förderlich für die Entwicklung von Anthracnose sind24 und (3) die Cu-Verbindungen nutzen Herausforderungen wie die geringe Empfindlichkeit des Krankheitserregers gegenüber Fungiziden auf Kupferbasis17 und die EU-Beschränkungen für die Verwendung von Pflanzenschutzmitteln bis zu einem Höchstwert von 4 kg Cu ​​pro Hektar und Jahr25.

Die Interaktion zwischen phytopathogenen Pilzarten und antagonistischen Mikroorganismen (z. B. biologischen Bekämpfungsmitteln) hat die Entwicklung einer biologischen Bekämpfung vieler Pflanzenkrankheiten26, einschließlich der Oliven-Anthracnose27,28, ausgelöst. Im Gegensatz dazu ist die Wechselwirkung zwischen phytopathogenen Erregern, die einen bestimmten Wirt beeinflussen, viel weniger bekannt29,30. Im Fall von Olivenanthracnose ist die Interaktion zwischen pathogenen Arten vor allem aus zwei Gründen von Interesse: Erstens, weil bis zu 18 Colletotrichum-Arten mit den Krankheiten in Verbindung gebracht wurden; und zweitens, weil in den meisten Olivenanbaugebieten eine dominierende Art mit mehreren Minderheitsarten koexistiert 6,10,11. Beispielsweise ist C. godetiae die vorherrschende Art in Griechenland, Italien und Spanien, wo sie zusammen mit anderen Arten, einschließlich C. nymphaeae, vorkommt, die viel seltener vorkommen11. Das gegenteilige Muster ist in Portugal zu beobachten, wo C. nymphaeae dominiert, während C. godetiae nur gelegentlich nachgewiesen wird4,8,11.

Viele ökologische Gründe könnten für das Vorkommen einer dominanten Colletotrichum-Art in einem bestimmten Olivenanbaugebiet verantwortlich sein, darunter (1) eine hohe pathogene Spezialisierung auf die Hauptsorte31, (2) eine bessere Anpassungsfähigkeit an agroklimatische Bedingungen24,31 oder (3) a hohe Fähigkeit, Olivenblätter zu infizieren und darin zu verbleiben7,10. Daher wurden in unserer Studie Tests durchgeführt, um die unterschiedliche Prävalenz von C. godetiae und C. nymphaeae in Spanien und Portugal zu klären. Glücklicherweise ermöglichten die morphologischen Merkmale der Kolonien in den Kulturmedien die Unterscheidung zwischen beiden Arten.

Erstens wurde die Konkurrenz zwischen C. godetiae und C. nymphaeae in Petrischalen in einem Dual-Kultur-Assay stimuliert. Insgesamt verdrängte C. godetiae seinen Konkurrenten, selbst wenn ein geringer Anteil der Sporen dieser Art (5 vs. 95 %) zunächst auf zwei Medien mit unterschiedlichen Kohlenstoffkonzentrationen (PDA und verdünntes PDA) übertragen wurde 32,33. Unterschiede in der Fähigkeit zur Assimilation von Kohlenstoffquellen zwischen Colletotrichum-Pilzarten sind bekannt und wurden in taxonomischen Vorschlägen berücksichtigt34.

Anschließend inokulierten wir zwei große portugiesische und spanische Olivensorten („Galega Vulgar“ und „Hojiblanca“) mit den Arten C. nymphaeae und C. godetiae, um eine mögliche Sortenspezialisierung (dh eine signifikante Interaktion zwischen Sorte und Art) zu untersuchen. Entgegen den Erwartungen wurde jedoch keine Sortenspezialisierung festgestellt und beide Arten zeigten eine ähnliche Virulenz. Darüber hinaus führten Fruchtimpfungen mit beiden Arten weder zu einer Erhöhung noch zu einer Verringerung der Schwere der Anthracnose-Symptome, d. h. es traten keine synergistischen oder antagonistischen Effekte auf35. Auch wenn es sich um eine koinokulierte Frucht handelte, verdrängte C. godetiae konkurrenzfähig C. nymphaeae, allerdings handelte es sich um eine teilweise Verdrängung (kein Ausschluss) und abhängig von der Sorte und der Inkubationstemperatur.

Darüber hinaus untermauerten inokulierte Olivenfrüchte den Unterschied in der Anfälligkeit für beide Colletotrichum-Arten der Gattung. Galega vulgär (anfällig) und Lebenslauf. Hojiblanca (sehr anfällig), zuvor als natürliche Infektionsbedingungen eingestuft 11. Das Fehlen einer Interaktion zwischen Colletotrichum-Arten und -Sorten ist für Olivenzuchtprogramme von wesentlicher Bedeutung, da die Zucht auf ein breites Spektrum von Krankheitserregerarten ausgerichtet werden kann. Talhinhas et al. zeigten, dass die italienische Sorte Frantoio gegen mehrere Colletotrichum-Arten äußerst resistent ist36. Dies macht sich sogar bei neuen Olivengenotypen mit „Frantoio“-Stammbaum bemerkbar37.

Verschiedene Colletotrichum-Arten können unterschiedliche Organe in einem einzelnen Wirt befallen, wie dies beim Orangenbaum der Fall ist, bei dem C. acutatum Blüten infiziert und das Syndrom hervorruft, das als Fruchtabfall nach der Blüte bekannt ist. C. gloeosporioides wiederum verursacht Fruchtnekrose während der Reifung und der anschließenden Orangenlagerung38. In Spanien deuten unsere Feld- und Versuchsdaten auf eine Spezialisierung von C. godetiae auf die Infektion von Olivenfrüchten hin, während Blätter als Inokulumquelle nur eine minimale Rolle spielen, da der Erreger in diesen Geweben im Feld keine Acervuli entwickelt (Acervuli können nur beobachtet werden). in inokulierten Blättern nach einer langen Inkubationszeit unter künstlichen Feuchtigkeitsbedingungen, J. Moral persönliche Beobachtung)7. Umgekehrt gelten infizierte Blätter in anderen Ländern als sekundäre Inokulumquelle10,39. In jedem Fall stellt die Überlebensfähigkeit von Colletotrichum, sich in Olivenblättern anzusiedeln, einen erheblichen Wettbewerbsvorteil für den Erreger dar10. In unserer Studie war die Fähigkeit von C. godetiae-Arten, sich in abgelösten Olivenblättern zu etablieren, höher als die von C. nymphaeae-Arten. Was das Überleben von Krankheitserregern in Olivenblättern im Laufe der Zeit betrifft, so erreichten beide Pilzarten stetige Infektionen in 30 % der Blätter, diese Rate ging jedoch im Laufe der Saison allmählich zurück. Dies weist erneut auf die relativ geringe Bedeutung infizierter Blätter als Inokulumquelle für die nächste Saison hin, insbesondere im Vergleich zu mumifizierten Früchten, in denen der Krankheitserreger Millionen von Sporen produziert40. Bemerkenswerterweise wurde in keinem der inokulierten Blätter oder Pflanzen Colletotrichum acervuli beobachtet. Auf jeden Fall belegen keine wesentlichen Unterschiede zwischen C. godetiae und C. nymphaeae die Prävalenz einer Art gegenüber einer anderen.

Die Konkurrenzfähigkeit einer bestimmten Colletotrichum-Art wird durch ihre Resistenz gegenüber den wichtigsten Fungiziden in Olivenplantagen (z. B. Verbindungen auf Kupferbasis) verbessert3,4,5. Basierend auf den Hemmungen des Myzelwachstums und der Sporenproduktion aufgrund von Cu-Änderungen haben wir hier gezeigt, dass C. godetiae-Stämme von dieser Verbindung weniger betroffen sind als die von C. nymphaeae. Im Gegensatz zu anderen Studien, in denen resistente Pilzstämme eine höhere Fähigkeit zeigten, Cu in ihren Myzelien zu speichern22, neigten die C. godetiae-Stämme unserer Studie dazu, weniger Cu anzusammeln als die von C. nymphaea. Wir haben zuvor Unterschiede in der Cu-Resistenz zwischen beiden Arten hinsichtlich der Sporenkeimung in Gegenwart dieser Verbindung beschrieben17. Während der wiederholte Einsatz kupferbasierter Fungizide einen starken Selektionsdruck hervorrufen kann, stehen für die Olivenplantagen, aus denen die Stämme gesammelt wurden, keine Pestizidanwendungen zur Verfügung. Außerdem haben wir Obstgärten mit relativ jungen Pflanzen (6–15 Jahre) ausgewählt und dabei Colletotrichum-Stämme aus alten Obstgärten ausgeschlossen, in denen es zu einem Akkumulationsprozess von Kupfer kommt41. In jedem Fall weisen Fungizide auf Kupferbasis eine Wirkung an mehreren Standorten auf; Daher besteht ein geringeres Risiko, dass Krankheitserreger Cu-Resistenzen entwickeln42.

Kurz gesagt, wir haben ein effizientes Protokoll zur Simulation von Interaktionszyklen zwischen Colletotrichum-Arten für Wettbewerbsstudien entwickelt. Unsere Ergebnisse zeigten, dass C. godetiae-Stämme dazu neigten, diejenigen von C. nymphaeae sowohl auf Kulturmedien als auch auf Olivenfrüchten zu verschieben (kein vollständiger Ausschluss). Die klassische Koexistenztheorie argumentiert, dass die Koexistenz von Arten in einer Nische nicht möglich ist, wenn Arten nach dem Wettbewerbsausschlussprinzip44 um eine einzige limitierende Ressource konkurrieren (Übersicht von Mittelbach und McGill43). Während die Koexistenz beider Colletotrichum-Arten in jedem Olivengarten gut beschrieben wurde10,11,14, könnten konkurrierende Wechselwirkungen zwischen diesen Arten hauptsächlich auf der Ebene einzelner Bäume und nicht auf der Ebene des Hains auftreten, da die Anthracnose-Epidemie in erster Linie bei einem bestimmten Baum auftritt angetrieben durch den Selbstinfektionsprozess innerhalb der Baumkronen24. Außerdem können Olivenfrüchte nicht als limitierende Ressource für den Krankheitserreger angesehen werden, da selbst unter den für die Krankheit günstigsten Bedingungen reichlich gesunde Früchte vorhanden sind17. Auf jeden Fall ist die Koexistenz konkurrierender Pilzarten bekannt und trotz der Konkurrenz um eine einzige Ressource unter verschiedenen Mechanismen zulässig45,46. In unseren Pathosystemen könnte beispielsweise ein Prioritätseffekt (dh die ursprünglichen Kolonisatoren sind nur schwer zu verdrängen) für die Koexistenz beider Pilzarten verantwortlich sein47,48. Darüber hinaus müssen andere Eigenschaften, die eine Colletotrichum-Art zu einem besseren Konkurrenten machen (z. B. die Fähigkeit, Unkräuter zu infizieren), noch untersucht werden. Schließlich schließen wir nicht aus, dass sich die Colletotrichum-Population, die Oliven befällt, aufgrund agronomischer und klimatischer Faktoren ändern könnte, wie vorgeschlagen15. Weitere Erkenntnisse über Colletotrichum-Gemeinschaften in Olivenhainen könnten ein wirkungsvolles Instrument zur Identifizierung von Populationsveränderungen und zur Auswahl geeigneter Fungizide sein.

Die während der aktuellen Studie generierten und/oder analysierten Datensätze sind auf begründete Anfrage beim jeweiligen Autor erhältlich.

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JM ist ein Ramon y Cajal-Stipendium (RYC2019-028404-I), dessen Forschung durch das von der spanischen Regierung (MICIN) ins Leben gerufene EPIDEMIOLIVE-Projekt (PID2020-117550RA-I00) unterstützt wird. Darüber hinaus wurde diese Forschung durch das Gen4Olive-Projekt (H2020-Programm; Zuschuss-Nr. 101000427) der Europäischen Kommission unterstützt. Abschließend danken die Autoren Paqui Luque und Halil Sucu für ihre unschätzbare Hilfe bei den Experimenten.

Landwirtschaftsministerium, Maria de Maeztu Excellence Unit, Universität Cordoba, Edif. C4, Campus Rabanales, 14071, Cordova, Spanien

M. Teresa Garcia-Lopez, M. Socorro Serrano, Ana Gordon, Cristina Estudillo, Antonio Trapero, Concepcion M. Diez und Juan Moral

Abteilung für Pflanzenpathologie, University of California-Davis, Kearney Agricultural Research and Extension Center, Parlier, CA, 93648, USA

M. Teresa Garcia-Lopez & Boris X. Camiletti

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MTGL, MSS und CE führten die Experimente durch, analysierten Daten und trugen zum Verfassen von Manuskripten bei. BXC führte Experimente durch und trug zum Schreiben von Manuskripten bei. AG und CMD waren am Studiendesign und der Manuskriptbearbeitung beteiligt. AT stellte die Finanzierung der Studie bereit. JM konzipierte die Experimente, stellte die Finanzierung bereit, trug zur Datenanalyse bei und war Mitautor des Manuskripts. Alle Autoren haben die veröffentlichte Version des Manuskripts gelesen und ihr zugestimmt.

Korrespondenz mit Juan Moral.

Die Autoren geben an, dass keine Interessenkonflikte bestehen.

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Nachdrucke und Genehmigungen

Garcia-Lopez, MT, Serrano, MS, Camiletti, BX et al. Untersuchung der Konkurrenz zwischen Colletotrichum godetiae und C. nymphaeae, zwei pathogenen Arten in Olivenbäumen. Sci Rep 13, 5344 (2023). https://doi.org/10.1038/s41598-023-32585-6

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Eingegangen: 09. November 2022

Angenommen: 29. März 2023

Veröffentlicht: 01. April 2023

DOI: https://doi.org/10.1038/s41598-023-32585-6

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